Molekularna biologija: Razlika med redakcijama

Izbrisana vsebina Dodana vsebina
Schjora (pogovor | prispevki)
Schjora (pogovor | prispevki)
vsebinski popravki
Vrstica 4:
== Tehnike molekularne biologije ==
 
V molekularni biologiji se uporabljajo naslednje tehnike:
Sprva nas zanima, kako sploh pridobiti biološki material, ki ga bomo kasneje lahko uporabili za preučevanje.
*:izolacija nukleinskih kislin (DNA, RNA)
*:ločevanje nukleinskih kislin ([[agarozna gelska elektroforeza]], [[poliakrilamidna gelska elektroforeza]]
*:[[verižna reakcija s polimerazo]]
 
== Kako izolirati nukleinske kisline? ==
Vrstica 10 ⟶ 13:
* Izolacija DNA
Najprimernejš vir so [[levkociti]] ali bele krvničke. Za postopek potrebujemo najmanj 30mL krvi, to nato damo v epruveto, ki vsebuje analizni agent.
Dodamo '''[[hipotonično]]''' raztopino- to nam namreč omogoča, da se celice 'napijejo' vode in s tem razpočijo. Zanimivo pa je, da pri tem razpočijo le [[eritrocit|eritrociti]] ali rdeče krvničke, medtem ko levkociti ostanejo nedotaknjeni.
Kri nato zberemo, [[centrifugiramo]] in operemo. Za uničenje notranje membrane uporabimo '''detergent''' ali natrijev docecilsulfat.
Dodatek '''[[proteina K]]''' pa prispeva k uničenju proteinov in s tem osoboditvi molekule DNA.
DobimotorejDobimo torej raztopino DNA, ki vsebuje drobe, ki pa jih moramo očistiti. To naredimo z dodatkom fenola in kloroforma. '''Fenol''' namreč uniči proteine, '''kloroform''' pa raztopi organske delce. Ker nukleinske kisline, kamor spada tudi DNA ni so topne v organskem topilu, se razporedijo v vodno fazo. (gostota nukleinskih kislin je večja od 1).
 
V organski fazi se tako nahajajo lipidi in proteini,